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如何对生化分析仪进行校准
发布者:洛阳一级欧美免费大片视频机箱科技 发布时间:2015-2-12 阅读:1354次【字体:
一个实验室测定结果的可靠性是由其精密度、一级欧美免费大片视频准确性及可比性所决定的,一般必需从下面几方面着手。
  一. 选好测定方法;二. 购买质量过硬的试剂盒;三. 要有质优的测试仪器;四. 必需进行正确的校准;五. 还要规范化操作;六. 搞好过硬的室内质量控制;七. 积极参加室间质评活动;八. 还要有一支素质高的队伍。
  现就生化分析仪的校准问题提出个人看法。
  一、一级欧美免费大片视频 校准的重要性和必要性首先必须明确生化分析仪不论如何先进,它还是一个比较器,它测试出来的标本结果是随着标准限的设置不同而变化的。所以,在卫生部临床检验中心拟定的“临床实验室(定量测定)室内质控工作指南”中明确指出“对测定标本的仪器一定要求进行校准,校准时要选择合适的(配套的)标准品/校准品;如有可能,校准品应能溯源到参考方法或/和参考物质;对不同的分析项目要根据其特性确立各自的校准频率。”这说明校准仪器是室内质控的重要部分,强调了校准工作的必要性和重要性,同时指出了校准的方法和要求。
  二、一级欧美免费大片视频 确立测定系统的概念对于一个临床检测项目,如果所用方法的测定原理、一级欧美免费大片视频试剂、一级欧美免费大片视频仪器、一级欧美免费大片视频校准品中任何一个不同,都可能得到不同的测定结果。因此,测定系统包括测定原理、一级欧美免费大片视频试剂、一级欧美免费大片视频仪器、一级欧美免费大片视频校准品四要素。如果我们想要得到准确可靠的测定结果,而该结果又具有与国际、一级欧美免费大片视频国内其他实验室的可比性,应该自己建立一个标准测定系统。在全自动生化分析仪上使用配套的试剂和标准品,即日立7170使用宝灵曼的试剂和校准品(c.f.a.s),在贝克曼CX-7生化分析仪上使用贝克曼的试剂和校准品等。各仪器厂家均有自己的标准测定系统。对于校准品不能乱用,如绝对不能用贝克曼的校准品校准日立生化仪,同样也不能用宝灵曼的校准品去校准贝克曼生化仪。
  三、一级欧美免费大片视频 校准品和质控品校准品(Calibration materials)含有已知量的欲测物,用以校准该测定方法的数值,它与该方法及试剂、一级欧美免费大片视频仪器是相关联的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、一级欧美免费大片视频试剂等造成的系统误差。因此最好为人血清基质,以减少基质效应造成的误差。
  质控品(Control materials)只用于和待测标本同时测定的,为了控制标本的测定误差,因此要求保存时间十分稳定。前者是校准其值而后者是控制误差用的。
  四、一级欧美免费大片视频 校准前准备1 .了解灯泡已使用多久?检查飘移是否合乎要求;2. 检查比色杯的清洁及磨损情况?必要时进行更换;3. 用清洁剂泡洗管道4. 测定仪器的精密度及线性是否达到仪器性能要求?
  五、一级欧美免费大片视频 定值质控血清是否可以校准仪器?
  我们在相同条件下,同时用五个进口产品,每家两种不同浓度的定值如TP、一级欧美免费大片视频ALB、一级欧美免费大片视频UREA、一级欧美免费大片视频UA、一级欧美免费大片视频ALP、一级欧美免费大片视频GGT、一级欧美免费大片视频CK、一级欧美免费大片视频HBDH、一级欧美免费大片视频LD、一级欧美免费大片视频AMY等,在日立7170A上进行测定(用常规试剂),详见质控血清对部份常规测定项目(如T、一级欧美免费大片视频ALB、一级欧美免费大片视频UREA、一级欧美免费大片视频Cr、一级欧美免费大片视频UA、一级欧美免费大片视频K、一级欧美免费大片视频Na、一级欧美免费大片视频Cl、一级欧美免费大片视频AST、一级欧美免费大片视频ALT)结果与靶值比较:
  表  不同厂家定值质控对TP、一级欧美免费大片视频ALB、一级欧美免费大片视频、一级欧美免费大片视频AST、一级欧美免费大片视频ALP结果与靶值比较TP ALB UREA AST ALPT 偏差% T 偏差% T 偏差% T 偏差% T 偏差%汽巴康1 57 4.39 29 0 5.0 4.5 43 -10.5 96 4.2汽巴康2 46 4.89 24 2.08 19.3 -5.76 184 -11.7 265 0.2宝灵曼1 50 2.0 34.8 -5.17 8.96 0.45 58.3 -11.2- 242 2.7宝灵曼2 48.6 2.88 33.7 -5.04 24 -6.77 140 -12.3 384 2.7RANDOX1 59.7 6.36 40.8 3.88 7.67 4.3 62 -17.7 214 -16.1RANDOX2 39 8.33 26.9 5.98 21.6 -5.67 144 -12.7 394 -17.1Human1 72 4.18 46.7 -4.18 3.78 5.16 33.5 -7.5 168 -2.2Human2 29.8 -2.68 29.8 -2.76 25.1 -5.08 151 -11.7 287 -9.1Bio-Red1 63 0 39 1.28 7.1 0 24 -14.6 25 22Bio-Red2 42 1.79 27 0 18.0 -4.44 201 -14.3 298 0.84* 从总蛋白结果来看RANBOX与Bio-Red 相差为6.45%,而宝灵曼与Bio-Red 较为接近;* 从白蛋白结果分析,宝灵曼与Bio-Red相对相差5.75%,与总蛋白结果明显不同。Bio-Red则与汽巴康冉辖咏。
  * UREA结果中凡是高值均上不去,分析其原因很可能与我们采用试剂盒的质量有关,所以试剂盒的线性范围理应成为选择试剂盒的重要依据之一。但从低值结果分析,也有5%的偏差(Bio-Red与Human)* AST与ALT测定值均低于靶值,这就涉及我们选用什么K值问题。
  * ALP测定中RANDOX(-16.6%)与宝灵曼(2.7%)靶值之间竟相差19.3%,这可能涉及试剂盒选用缓冲液种类,PH值以及所用ε值等有关。
  通过上述结果比较,说明不同厂家生产的定值质控血清靶值之间有的相差较大,提示我们决不能用定值质控血清代替校准品作校准用。
  六、一级欧美免费大片视频 校准方法例如日立(Hitachi)系列您必须购买宝灵曼(Boehringer)的试剂及其校准的说明书设置参数,用c.f.a.s.校准血清进行校准,即可获得各项目的校准K值,同时观察一下各项目测定时反应进程图,检查各项目参数设置是否在最佳位置,如不在最佳位置应予以重新设置并测定。此时得到的K值即为准确的校准K值,然后测定待测的10至20份新鲜血清三次取其平均值,应该说此结果是用Hitachi-Boehringer检测系统所获的测定值。然后用此血清值校准其它测定系统。
  表  日立7170、一级欧美免费大片视频BM试剂连续四个月每天进行校正(n=81)K值的变化TP ALB ALT AST Crea Urea UA TG Chol Glu Ca CK GGTMean 3017 694 3023 2274 14756 2673 1543 1272 1449 1744 592 3864 2603SD  86 6.69  63 49.7  1448 50.2 16.1 16.9 17.4 18.4 56.8 61.11 67.9CV%  2.8  1.0  2.1  1.7  9.8  1.9  1.1  1.4  1.2  1.0 9.6  1.6  6.9七、一级欧美免费大片视频 关于酶活性测定校准问题有的主张不进行校准而采用固定K值,有的作者以为应该进行校准。酶活力计算公式如下:
  酶活力(u/l)=△A/min×V×106/(ε×v×1)令k=V×106/(ε×v)则酶活力(u/l)=△A/min×k常用K值有以下几种:
  a) 理论K值:根据理论摩尔消光系数(ε)来计算,如NADH为6.22×103b) 实测K值:由于仪器波长的精密及半宽度不同,而应根据实测ε值来设定K值c) 厂家给的K值:厂家生产试剂盒说明书上提供的K值(有的厂家提供6.3×103)d) 校准K值:通过校准物直接校准得到的K值在日立7170A全自动生化分析仪上,可以得到几种不同的酶K值,见下表表 日立7170A全自动生化分析仪上用不同方法得到几种酶的K值指示物 波长 理论K值 实测K值 校准K值ALT NADH 340nm 2444 2642(8.1%) 3026(23.8%)AST NADH 340mm 2444 2642(8.1%) 2775(13.5%)CK NADPH 340mm 3878 3878(8.1%) 3886(8.3%)GGT 4NA 405mm 1418 1539(8.5%) 1612(13.7%)GGT 4NB 405mm 1475 1739(17.9%) ——ALP 4NA(PH10) 405mm 757 825(8.9%) ——注:1校准物为宝灵曼c.f.a.s,试剂也用宝灵曼的配套试剂。
  2括号内数字是该K值与理论K值相比的变化率以上摘自张克坚文章中* 从上述K值中不难发现实测K值大于理论K值,这说明生化分析仪的测光系统还存在着一定误差,如波长、一级欧美免费大片视频半宽度及光径等偏差,使仪器达不到理论上的最佳状态;* 校准K值与实测K值之间也存在一定的差距,即使指示物和仪器相同,其差异可能由试剂及校准品造成的;* 作者认为最好使用校准K值,但必须由两个先决条件:1必须使用配套的试剂;2必须使用配套的高质量的校准品,但校准K值应有其溯源性。
  关于酶活标准品,欧洲标准局(BCR)和美国国家标准技术研究院(NIST)均发表了人血清基质的酶活性标准物,相信不久将会有公认的标准(校准)品问世。
  八、一级欧美免费大片视频 必须拟订校准计划(文件)校准工作不是仅进行一次就可万事无忧一劳永逸,而必须经常化。按照“临床实验室质量控制(QC)的要求(草案)”必须要求拟定校准计划,其内容包括:
  1.建立校准方法⑴选择合适(配套)的校准品,包括校准品数目、一级欧美免费大片视频类型。
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